Während der häufiger verwendete Test, der den 25-OH-Vitamin D-Spiegel misst, das Gesamtvitamin D im Blut misst (einschließlich an Proteine gebundenem Vitamin D), misst die Bestimmung des freien Vitamin D nur den Anteil von Vitamin D, der nicht an Proteine gebunden ist. Dieser Test bietet daher eine genauere Darstellung des biologisch aktiven Vitamin D im Körper.